chemiDoc 化学发光凝胶成像检测仪的使用和注意事项
1 适用范围Ø 本SOP适用于chemiDoc 化学发光凝胶成像检测仪的使用和维。
2 职责Ø 操作人员:认真执行本SOP的内容,并作好相关记录。
Ø 设备管理员:培训、指导操作人员正确执行本SOP。
3 主要性能参数 3.1 像素大小:1392×1040;像素密度:16位(65536色);像素尺寸(H×V):6.7×6.7um分辨率:1.44百万像素;动态范围:大于4个数量级;镜头冷却系统/冷却温度:Peltier/-50℃;马达控制可变焦镜头:C-mount,f/1.2,12-75mm;照明模式 :透射紫外,白光及侧白光。 4 主要应用范围 5 核酸检测、Western杂交、双向凝胶电泳、光密度计算、克隆技术、斑点印迹等。 6 控制面板说明 见图1图1. 光源控制面板说明
Ø 按键功能说明
Power light
电源打开,开始工作
Imaging LED
1:指示灯闪烁,表示正在获取图像;2:指示灯闪烁可能在电脑关闭的时候
TransUV button
控制紫外透射器打开与否,如果Hold button没有打开,其功能15min自动关闭;
且当前门或者抽屉打开的时候其功能会自动关闭。请当心紫外线对人体损伤。
The Prep UV switch
先开trans uv才能开PREP UV,其功能为减弱透射紫外线的强度,可减少DNA长时间曝光于紫外线下的损伤。例如在进行的切胶操作的时候。
Epi White button
控制周围白光(两侧)打开与否,如果Hold button没有打开,其功能15min自动关闭;当透射紫外打开的时候,其功能自动关闭。
Trans White Light
控制白光透射打开与否,如果Hold button没有打开,其功能15min自动关闭;
Hold key
按下该按钮,实现紫外和白光自动关闭的功能丧失。请当心紫外线对人体损伤。
7 曝光控制面板Ø 机身面板
图2. 曝光控制面板
Ø 按键功能说明
IRIS
光圈大小控制
控制进光量大小:(+),进光量大,亮;(-)进光量小,暗。
ZOOM
图像大小控制
(+),图像大;(-),图像小
Focus
聚集控制
通过调节(+)和(-),使图像变得清晰。
8 操作步骤: 8.1 打开电源Ø 打开机身背部左下方机身电源开关,后打开CCD电源开关
图3. 机身电源开关(左)和CCD电源开关(右)
8.2 放入凝胶、调节位置Ø 打开抽屉放入琼脂糖凝胶(左)或SDS-PAGE凝胶或PDF(右)
图4. 两种凝胶载物台用于琼脂糖凝胶(左)或SDS-PAGE凝胶以及PDF(右)
Ø 打开Quantity One软件,点击File选择ChemiDocXRS,预热机器半小时,按下Select键,选择EPI White,周围白光功能打开,按下Live Focus按钮,调节凝胶位置居于视野中央。
图5. 打开软件,调用周围白光功能调节凝胶位置居于视野中央
8.3 曝光Ø 选择滤镜(机身右侧顶部)
滤镜
用于
功能
No Filter
白光
调节凝胶位置,SDS-PAGE和Western-Blot成像
Filter1
紫外
DNA琼脂糖凝胶成像
图6. 根据实验需要No Filter或Filter1
Ø 选择光源:
光源
功能
EPI White
调节样品放置位置
Trans White Light
SDS-PAGE凝胶成像
TransUV
DNA琼脂糖凝胶成像
Ø 按下Iris、Zoom、Focus按钮确定图像大小和最佳曝光参数
图7. 按下Iris、Zoom、Focus按钮确定图像大小和最佳曝光参数
Ø 曝光按钮选项
Auto Expose
Manual Expose
Live Acquire
自动曝光
手动曝光
按设定实时获取图像
图8.曝光功能按钮选项,左:自动曝光(Auto Expose),手动曝光(Manual Expose)
以及按设定实时获取图像(Live Acquire);右:实时获取图像参数的设定
9 图像采集与保存 9.1 图象采集模式中FREEZE:用于抓取当前图像。 9.2 图象采集模式中Save:用于储存图像。 9.3 图像格式转换:打开获取的图像,选择FileExpose to JPEG. 将转换成JPEG格式的图像用U盘拷贝即可在其他电脑上打开并编辑。 10 使用完毕后请关闭电源和清洁凝胶载物台Ø 为避免凝胶载物台被凝胶缓冲液腐蚀,使用完毕后,持泡沫浸没去离子水拧干后轻轻擦拭其表面。
Ø 为防止水蒸汽腐蚀CCD成像头,请使用完毕后敞开载物台,保持内部空间干燥。
11 注意事项Ø 不准使用化学发光凝胶成像仪做切胶回收,
Ø 实验者若发现图像模糊或有杂点,请勿擅自拆下镜头和滤光片进行擦拭,请通知设备管理员。
Ø 使用完毕后请关闭电源和清洁凝胶载物台