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FZYQ.05.001.140514<凝胶成像仪使用方法和注意事项图片大全>

FZYQ.05.001.140514

chemiDoc 化学发光凝胶成像检测仪的使用和注意事项

1            适用范围

Ø  本SOP适用于chemiDoc 化学发光凝胶成像检测仪的使用和维。

2            职责

Ø  操作人员:认真执行本SOP的内容,并作好相关记录。

Ø  设备管理员:培训、指导操作人员正确执行本SOP。

3            主要性能参数 3.1             像素大小:1392×1040;像素密度:16位(65536色);像素尺寸(H×V):6.7×6.7um分辨率:1.44百万像素;动态范围:大于4个数量级;镜头冷却系统/冷却温度:Peltier/-50℃;马达控制可变焦镜头:C-mount,f/1.2,12-75mm;照明模式 :透射紫外,白光及侧白光。 4            主要应用范围 5            核酸检测、Western杂交、双向凝胶电泳、光密度计算、克隆技术、斑点印迹等。 6            控制面板说明 见图1

图1. 光源控制面板说明

Ø   按键功能说明

Power light

电源打开,开始工作

Imaging LED

1:指示灯闪烁,表示正在获取图像;2:指示灯闪烁可能在电脑关闭的时候

TransUV button

控制紫外透射器打开与否,如果Hold button没有打开,其功能15min自动关闭;

且当前门或者抽屉打开的时候其功能会自动关闭。请当心紫外线对人体损伤。

The Prep UV switch

先开trans uv才能开PREP UV,其功能为减弱透射紫外线的强度,可减少DNA长时间曝光于紫外线下的损伤。例如在进行的切胶操作的时候。

Epi White button

控制周围白光(两侧)打开与否,如果Hold button没有打开,其功能15min自动关闭;当透射紫外打开的时候,其功能自动关闭。

Trans White Light

控制白光透射打开与否,如果Hold button没有打开,其功能15min自动关闭;

Hold key

按下该按钮,实现紫外和白光自动关闭的功能丧失。请当心紫外线对人体损伤。

7            曝光控制面板

Ø  机身面板

图2. 曝光控制面板

 

Ø  按键功能说明

IRIS

光圈大小控制

控制进光量大小:(+),进光量大,亮;(-)进光量小,暗。

ZOOM

图像大小控制

(+),图像大;(-),图像小

Focus

聚集控制

通过调节(+)和(-),使图像变得清晰。

8            操作步骤: 8.1        打开电源

Ø  打开机身背部左下方机身电源开关,后打开CCD电源开关

   

图3. 机身电源开关(左)和CCD电源开关(右)

8.2        放入凝胶、调节位置

Ø  打开抽屉放入琼脂糖凝胶(左)或SDS-PAGE凝胶或PDF(右)

    

图4. 两种凝胶载物台用于琼脂糖凝胶(左)或SDS-PAGE凝胶以及PDF(右)

 

Ø  打开Quantity One软件,点击File选择ChemiDocXRS,预热机器半小时,按下Select键,选择EPI White,周围白光功能打开,按下Live Focus按钮,调节凝胶位置居于视野中央。

   

图5. 打开软件,调用周围白光功能调节凝胶位置居于视野中央

8.3        曝光

Ø  选择滤镜(机身右侧顶部)

滤镜

用于

功能

No Filter

白光

调节凝胶位置,SDS-PAGE和Western-Blot成像

Filter1

紫外

DNA琼脂糖凝胶成像

图6. 根据实验需要No Filter或Filter1

Ø  选择光源:

光源

功能

EPI White

调节样品放置位置

Trans White Light

SDS-PAGE凝胶成像

TransUV

DNA琼脂糖凝胶成像

Ø  按下Iris、Zoom、Focus按钮确定图像大小和最佳曝光参数

图7. 按下Iris、Zoom、Focus按钮确定图像大小和最佳曝光参数

Ø  曝光按钮选项

Auto Expose

Manual Expose

Live Acquire

自动曝光

手动曝光

按设定实时获取图像

 

图8.曝光功能按钮选项,左:自动曝光(Auto Expose),手动曝光(Manual Expose)

以及按设定实时获取图像(Live Acquire);右:实时获取图像参数的设定

9            图像采集与保存 9.1             图象采集模式中FREEZE:用于抓取当前图像。 9.2             图象采集模式中Save:用于储存图像。 9.3             图像格式转换:打开获取的图像,选择FileExpose to JPEG. 将转换成JPEG格式的图像用U盘拷贝即可在其他电脑上打开并编辑。 10          使用完毕后请关闭电源和清洁凝胶载物台

Ø  为避免凝胶载物台被凝胶缓冲液腐蚀,使用完毕后,持泡沫浸没去离子水拧干后轻轻擦拭其表面。

Ø  为防止水蒸汽腐蚀CCD成像头,请使用完毕后敞开载物台,保持内部空间干燥。

11          注意事项

Ø  不准使用化学发光凝胶成像仪做切胶回收,

Ø  实验者若发现图像模糊或有杂点,请勿擅自拆下镜头和滤光片进行擦拭,请通知设备管理员。

Ø  使用完毕后请关闭电源和清洁凝胶载物台

 

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