最近在使用老版本的基因组时，需要从V4转到V3,使用Picard的Liftover函数一直报错，经查询可能是基因组文件有问题。在经历多次探索，发现基因组文件不正确。基因组文件格式一般是：fasta或者是fa.gz在基因组组装时，是从contig组装成scaffold，然后在根据图谱，组装到Chromosome染色体上。我把Scaffold当作Chromosome格式使用，程序自然会报错。
目前可以使用三代测序数据重新组装基因组，从scaffold到chromosome水平。最新的工具：RaGOO(基于minimap2). github论文
contig/scaffold 和 N50/N90把测序的reads拼接，如果可以完全拼接起来，中间没有gap,则是contig.如果中间有gap，但是知道gap的长度，这样的序列称为scaffold.contig N50 和scaffold N50把contig或scaffold按照从大到小的顺序排列，长度达到基因组大小（所有contig或scaffold的长度）的50%时，那条contig/scaffold的长度，即为contig/scaffold N50. N50越大，说明基因组组装的质量越高。同理还有N90,即达到基因组大小90%时的contig/scaffold的长度。