图8.人 iPSC 诱导的前脑类器官中 β -3 微管蛋白 (绿色) 和 PAX6 (洋红色) 的免疫组织化学分析。在第 40 天，人体 iPSC 诱导的类器官在室温下用 4% 甲醛固定 1 小时，并在 4°C 下在 30% 蔗糖溶液中培养过夜。然后将类器官包埋在OCT包埋剂中，在以5µm处冷冻切片，用0.2% Triton X-100洗涤剂渗透20分钟，用10%驴血清在PBS中封闭30分钟。将类器官切片与 Invitrogen 抗 β -3 微管蛋白小鼠单克隆抗体 (克隆号 2G10) 1 ： 500 稀释 和 Invitrogen 抗 PAX6 兔多克隆抗体在 4°C 下过夜， 然后用 1 ： 1 ， 000 稀释的 Invitrogen Alexa Fluor 488 驴抗小鼠 IgG ReadyProbes 二抗 (绿色) 和 Invitrogen Alexa Fluor 568 驴抗兔 IgG 二抗 (洋红色) 以及 DAPI (蓝色) 在室温下封闭溶液中染色 1 小时图像在显微镜上20x采集。Scale bar: 50 µm.经美国乔治亚州亚特兰大市埃默里大学医学院助理教授温哲星同意转载。
免疫组织化学技术 赛默飞FC错误代码修复
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